Produção e caracterização de um antissoro policlonal para detecção de ds-RNA

• Author(s): Rodrigues, Paula ; Carvalho, Miguel ; Nazaré-Pereira, Ana Maria
• Date: 1998
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10198/3667
• Origin: Biblioteca Digital do IPB
• Subject(s): ds-RNA; Selecção clonal; Testes serológicos
• Document Type: Article
• Language: Portuguese

Description

A maioria dos vírus fitopatogénicos contém no seu genoma ácido ribonucleico monocatenário(ss-RNA). Este ácido nucleico viral tem capacidade de replicação no interior das células vegetais,dando origem a uma forma replicativa de ácido nucleico bicatenário (ds-RNA). Considerando que asplantas não infectadas não contêm quantidades detectáveis de ds-RNA, a presença deste ácidonucleico em extractos de plantas é uma forte indicação de infecção viral.Produzimos um antissoro policlonal para um polinucleótido sintético [poli(I):poli(C), cadeia dupla, estéril] (Pharmacia 27-4729-01). O antissoro foi caracterizado quanto à sua reactividade por ID-ELISA e o seu título determinado em teste de dupla difusão em agar.A aplicabilidade do antissoro em testes de diagnóstico foi testada em material infectado, nomeadamente com o vírus associado ao enrolamento foliar da videira.Apesar de não ser um diagnóstico específico, a detecção de RNA bicatenário a partir de extractos de ácidos nucleicos poderá desempenhar um papel importante em programas de selecção sanitária quando a identificação do patogénio é irrelevante. Most plant viruses have single stranded RNA genome (ss-RNA). This nucleic acid presents a double stranded replicating form (ds-RNA) when replicating in p1ant cells. Healthy plants have no detectable amounts of ds-RNA thus, the presence of ds-RNA is a strong indication of viral infection. We produced a po1yclonal antiserum for a synthetic nucleotide [poly(I):poly(C), double stranded, sterile. Reactivity of the antiserum was characterized by ID-ELISA and titre of the antiserum was determined by agar double diffusion tests. The usefulness of this antiserum in the detection of viral infection has been tested namely for one grapevine associated leafroll virus (GLRaV-3). Detection of ds-RNA is not a specific diagnostic method. However, it can be useful in sanitary programs when the identity of the pathogen is irrelevant.