Author(s):
Galvão, António Miguel Gonçalves Travassos 
Date: 2011
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.5/3738
Origin: Repositório da UTL
Subject(s): TNF; IFNG; FASL; Corpus luteum; Luteotrophic; Luteolysis; Endometrium; Angiogenesis; Mare; FNT; Corpo lúteo; Luteotrófico; Luteólise; Endométrio; Angiogénese; Égua
Description
Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias. Especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas Coordination of reproductive events in the ovary and uterus demands the action of diverse factors as
steroid hormones, eicosanoids, growth factors or cytokines on the regulating of processes such as
angiogenesis, cell growth and differentiation, and apoptosis. Thus, the objectives of this study were
to evaluate the influence of cytokines tumor necrosis factor α (TNF), interferon gamma (IFNG) and
Fas Ligand (FASL) on the regulation of secretory function, angiogenesis, cell viability and
apoptosis in the equine: (i) corpus luteum (CL) during luteal establishment and functional and
structural regression; and (ii) endometrium during follicular phase (FP) and mid luteal phase
(MLP), at cell, gene and molecular levels. All studied cytokine ligands and receptors were
expressed in the equine CL, throughout the luteal phase, and in the endometrium, throughout the
estrous cycle. During CL growth, TNF was shown to stimulate in vitro P4 and PGE2, to inhibit
PGF2α secretion and to increase VEGF expression and angiogenic factors production. Thus, among
all cytokines studied, TNF might give a luteotrophic contribution for CL establishment. Conversely,
during CL regression, all cytokines alone reduced P4 and PGE2 secretion, while both FASL and
TNF stimulated PGF2α secretion. TNF and IFNG reduced angiogenic factors secretion and FASL
decreased VEGF expression. Cytokine association (TNF+IFNG+FASL) effectively promoted
apoptosis and reduced luteal cell viability. Besides, they stimulated PGF2α and inhibited P4, PGE2
secretion and angiogenesis. In conclusion, cytokines interaction appears to coordinate functional
and structural luteolysis in the mare. Concerning TNF role on endometrial cells, it can be concluded
that during MLP, this cytokine stimulated PGE2 secretion, promoted angiogenic activity and NO
secretion and increased endometrial cells viability. The interaction between TNF, oxytocin and
steroid hormones was shown to be determinant for physiologic regulation of equine endometrium. RESUMO - Novas perspectivas na regulação imuno-endócrina da reprodução equina:
estudos in vitro da função lútea e endometrial. -
A coordenação da função reprodutora no ovário e no útero requer a participação de diversos
factores como hormonas esteróides, eicosanóides, factores de crescimento ou citocinas,
responsáveis por regular processos biológicos como a angiogénese, o crescimento e diferenciação
celular e a apoptose. Assim, o presente estudo teve como objectivo avaliar a influência das
citocinas factor de necrose tumoral α (FNT), interferão gama (IFNG) e Fas Ligando (FASL) na
regulação da função secretora, angiogénese, viabilidade celular e apoptose: (i) no corpo lúteo (CL)
durante o seu estabelecimento e regressão funcional e estrutural; e (ii) no endométrio durante as
fases folicular (FF) e lútea média (FLM), a nível celular, molecular e genético na égua. A expressão
de todos os ligandos e receptores das citocinas estudadas foi confirmada no CL, ao longo da fase
lútea, e no endométrio, ao longo do ciclo éstrico. Durante o crescimento do CL, FNT estimulou a
produção in vitro de P4 e PGE2, inibiu a secreção de PGF2α e aumentou a expressão de VEGF e a
produção de factores angiogénicos. Desta forma, de todas as citocinas estudadas, FNT poderá
contribuir como factor luteotrófico para o estabelecimento do CL. Contrariamente, aquando da
regressão lútea, todas as citocinas individualmente reduziram a secreção de P4 e PGE2, enquanto
FASL e FNT estimularam a secreção de PGF2α. FNT e IFNG inibiram a secreção de factores
angiogénicos e FASL diminuiu a expressão de VEGF. A associação de citocinas
FNT+IFNG+FASL promoveu de forma efectiva a apoptose e a redução da viabilidade das células
lúteas. Além disso, estimulou a secreção de PGF2α e diminuiu as de P4 e PGE2, bem como inibiu a
angiogénese. Concluindo, a interacção entre as várias citocinas parece coordenar a regressão
funcional e estrutural do CL na égua. Considerando o papel do TNF nas células endometriais,
conclui-se que, durante a FLM, este factor estimulou a secreção de PGE2, promoveu a produção de
factores angiogénicos e de NO e aumentou a viabilidade das células endometriais. A interacção
entre o FNT, a ocitocina e as hormonas esteróides provou ser determinante para a regulação
fisiológica do endométrio equino.
