Author(s):
Maio, Diogo António Gonçalves Candeias da Guerra 
Date: 2012
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.6/1201
Origin: Ubi Thesis - Conhecimento Online
Subject(s): Ciclosporina; Ciclosporina - Doenças cardiovasculares; Sirolimus - Doenças cardiovasculares; Fármacos imunossupressores; Canais de cálcio; Stress - Hipertensão
Description
A hipertensão arterial (HTA) pós-transplante é um fator de risco cardiovascular que pode comprometer a longo prazo a eficácia do transplante. A Ciclosporina A (CsA) é um dos imunossupressores mais utilizados na prevenção da rejeição de órgãos em doentes transplantados, bem como em doenças autoimunes. No entanto, o seu uso clínico é prejudicado pelo desenvolvimento de HTA, pela sua significativa nefrotoxicidade e, também, pelo desenvolvimento de disfunção endotelial e vasculopatia a nível do transplante.O Sirolimus (rapamicina, SRL) é uma lactona macrocíclica com um novo mecanismo de ação imunossupressora. O seu alto grau de sinergismo com a CsA permite uma eficiente prevenção da rejeição assim como uma minimização da toxicidade induzida pela CsA. Contudo, muito pouco é conhecido tendo em consideração os supostos mecanismos associados à proteção cardiorenal e aos efeitos vasomotores, distintos dos associados à CsA. O objetivo desta atividade experimental foi avaliar os efeitos vasculares do SRL e/ou CsA em culturas de células da aorta de rato (A7r5) e, também, comparar os efeitos cardiorenais dos dois fármacos num modelo animal (rato). As técnicas de whole cell patch clamp e de planar cell surface area (PCSA) foram utilizadas para analisar a atividade dos canais de cálcio tipo L (LTCC) e a contratilidade celular, respetivamente. As respostas de relaxamento induzidas pela CsA e SRL no efeito contrátil da noradrenalina (NA, 1μM), serotonina (5-HT, 1μM) e Bay-K (0.1nM) foram determinadas por PCSA. A CsA teve um efeito de relaxamento até um máximo de 140% sobre o efeito contrátil da 5-HT, 120% sobre o efeito da NA e 110% sobre o efeito do Bay-K. O SRL exibiu uma percentagem máxima de relaxamento de 100% sobre os efeitos contráteis da 5-HT e da NA e um máximo de 125% sobre o efeito do Bay-K. A combinação dos dois compostos evidenciou um efeito de relaxamento sobre a ação dos agentes contráteis (45-140%). As análises eletrofisiológicas do whole cell patch clamp demonstraram um efeito inibitório da CsA (8nM-12nM) e SRL (10nM-10μM) sobre os LTCC. A adição da concentração de 10μM de SRL à CsA 4μM potenciou este efeito inibitório sobre este tipo de canais de cálcio. Estes resultados indicam que o efeito de relaxamento das células A7r5 do SRL e da CsA é mediado pela inibição dos LTCC. O modelo animal de 9 semanas com ratos envolveu o uso de concentrações dos fármacos que mimetizam as usadas na prática clínica. A CsA promoveu disfunção cardiorenal, caraterizada por desenvolvimento de HTA arterial, taquicardia, aumento da ureia sérica, juntamente com dislipidemia. O SRL promoveu menos efeitos secundários cardiorenais, mas demonstrou ser igualmente pró-hipertensiva e pró-dislipidémica. Em conclusão, este trabalho permitiu esclarecer alguns aspetos relativos aos efeitos cardiorenais dos dois fármacos imunossupressores; todavia merece continuação, de forma a permitir a compreensão dos mecanismos celulares/moleculares destes fármacos, o que será muito importante para a prevenção destes efeitos secundários graves pós-transplante. Para além disso, poderá ser essencial para o desenvolvimento de novos imunossupressores, tão específicos e eficazes como os atuais, mas menos tóxicos a nível cardiovascular e renal, de forma a melhorar a sobrevida dos enxertos e prolongar a vida do doente transplantado.
