Author(s):
Pinto, Pedro Miguel da Costa Amaral 
Date: 2011
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/8225
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Citologia; Citotoxicidade; Toxicologia genética; Ciclo celular; Patologia celular; Sarcomas
Description
Sulforafano (SFN) é o isotiocianato mais extensivamente estudado , com
especial foco na sua atividade anti-tumoral e é encontrado principalmente em
grande quantidade nos brócolos. Vários estudos têm demonstrado a
capacidade do SFN em causar paragem do ciclo celular, embora, nas linhas
de osteosarcoma, os efeitos do SFN sobre a proliferação celular e a
progressão do ciclo celular estejam ainda pouco compreendidos.
O objetivo deste estudo foi investigar a capacidade do SFN em induzir a
paragem do ciclo celular, o seu efeito na proliferação celular, bem como
potenciais efeitos genotóxicos em linhas celulares humanas de osteosarcoma.
Para realizar este objetivo, as células MG-63 foram expostas a diferentes
concentrações de SFN (5 e 10 μM) em diferentes períodos (24 e 48h). O
crescimento e morfologia celular foram observados diariamente usando
um microscópio invertido. A viabilidade celular foi determinada usando
o ensaio de redução metabólica MTT. O ciclo celular foi avaliado por citometria
de fluxo. A avaliação de danos no DNA foi realizada pelo ensaio cometa.
Observou-se para ambos períodos de exposição que a maior concentração de
SFN reduziu a viabilidade celular em cerca de 33% e 40%, relativamente ao
controlo. A progressão do ciclo celular também foi afetada para a dose mais
alta de SFN, verificando-se um aumento na percentagem de células na
fase G2 para ambos os períodos. Da mesma forma, quanto maior a
concentração de SFN maior a indução do aumento no dano no DNA. Por fim,
estes resultados indicam que o SFN inibiu a proliferação e induziu paragem do
ciclo celular e genotoxicidade em células de osteossarcoma humano. Sulforaphane (SFN) is the most extensively studied isothiocyanate, focused in
its anti-tumoral activity and it is mainly found in great amounts in broccoli.
Several studies have shown the ability of SFN to cause cell cycle arrest,
however, regarding osteosarcoma cell lines, the effects of SFN on cell
proliferation and cell cycle progression are still poorly understood.
The aim of this study was to investigate the effects of SFN on cell proliferation
and its ability in inducing cell cycle arrest and genotoxicity in human
osteosarcoma cell lines.
MG-63 cells were exposed to different concentrations of SFN (5 and 10 μM)
for different time periods (24 and 48h). Cell growth and morphology was daily
observed using in an inverted microscope. Cell viability was determined using
the MTT reduction assay. Cell cycle was evaluated by flow cytometry.
Evaluation of DNA damage was performed by the comet assay.
For both periods of exposure, the highest SFN dose reduced cell viability in
about 33% and 40% of the control. Cell cycle progression was also affected for
the highest SFN dose, with an increase in the percentage of cells in the G2
phase. Similarly, the highest SFN dose induced an increase in DNA damage.
At last our results indicate that SFN inhibited proliferation and induced cell
cycle arrest and genotoxicity in human osteosarcoma cells. Mestrado em Biologia Aplicada - Biologia Molecular e Celular
Document Type
Master Thesis
Language
Portuguese
Advisor(s)
Oliveira, Helena Cristina Correia de; Santos, Conceição
