Autor(es):
Machado, David Alexandre Ferreira 
Data: 2011
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10773/8181
Origem: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Assunto(s): Bioquímica; Bexiga; Cancro; Glicoproteínas
Descrição
O cancro de bexiga encontra-se em quinto lugar entre as neoplasias
malignas mais prevalentes no mundo inteiro. A maioria são tumores papilares
superficiais não-invasivos e, quando são detectados precocemente, a taxa de
sobrevivência em cinco anos é de aproximadamente 94%. Portanto, a
intervenção a tempo torna-se determinante neste caso. No entanto, a
recidivação é frequente e encontra-se muitas vezes acompanhada pelo
agravamento do grau do tumor ou mesmo da progressão em eventos
metastáticos e invasão muscular. Como tal, tanto o diagnóstico precoce como
a classificação histopatológica precisa são essenciais para o manipulamento
desta doença. Ainda assim, estão actualmente disponíveis biomarcadores
moleculares com falta de sensibilidade e especificidade e, muitas vezes falham
na classificação do tumor.
As transformações malignas são frequentemente acompanhadas por um
desequilíbrio nas vias de glicosilação que resultam em glicosilações
aberrantes, estas podem ser usadas para o diagnóstico e diferenciação do
tumor. Reconhecendo estes factos, o presente trabalho tem como objectivo o
estabelecimento de um perfil O-glicosídico para glicoproteínas urinária no
cancro de bexiga. Para este estudo, foi utilizado a urina de doadores
saudáveis do sexo masculino e de indivíduos com carcinomas papilares de
alto grau, baixo grau e invasivos. As glicoproteínas urinárias foram Ndesglicosiladas
com PNGase F e as suas O-glicanas foram quimicamente
libertadas pela -eliminação redutiva e seguidamente caracterizadas em
relação à sua composição em açúcares e perfil de ligações por GC-EI-qMS.
Os resultados obtidos demonstram uma diminuição na expressão de epítopos
de Le com o estadio tumoral. Estes eventos são acompanhados por um
aumento no conteúdo de ácidos siálicos, que são mais pronunciados para
estadios avançados. Estas alterações agora descritas para a urina de doentes
com cancro de bexiga estão em concordância com observações feitas por
outros autores ao nível do tecido. Adicionalmente, estudos de immunoblotting
revelaram um aumento de expressão dos ácidos siálicos em ligação 2,6 e
epítopo associado a tumores sTn (Neu5Ac 2-6GalNAc 1-O-Ser/Thr).
Estes resultados demonstram que a urina de doentes com cancro de bexiga
apresenta um perfil O-glicosídico que reflecte transformações malignas na
bexiga, principalmente em estadios mais avançados. Bladder cancer ranks among the 5th most prevalent malignancies
worldwide. The majority are superficial non-invasive papillary tumors and, when
early detected, the 5-year survival rate is approximately 94%. Therefore, timely
intervention is determinant. Nevertheless, recidivation is frequent and often
accompanied by worsening of tumour grade or even progression into muscle
invasive and metastatic events. As such, both early diagnosis and accurate
histopathology classification are essential for the management of this disease.
Still, currently available molecular biomarkers lack sensitivity and specificity
and often fail in classifying the tumour.
Malignant transformations are frequently accompanied by an unbalance
in glycosylation pathways that result in aberrant glycosylation that can be used
for diagnosis and tumour differentiation. Acknowledging these facts, the
present work was devoted to establishing an O-glycomic signature for urinary
glycoproteins in bladder cancer. Urine from healthy male donors and patients
with low- and high-grade and invasive urothelial cell carcinomas were elected
for this study. Urinary glycoproteins were N-deglycosylated with PNGase F and
the O-glycans chemically-released by reductive -elimination and characterized
in relation to their sugars composition and linkage profile by GC-EI-qMS. Data
highlights a decrease in Lewis epitope expression which is more pronounced in
more aggressive and invasive tumors. These events are accompanied by an
increase in sialic acids content, which are more pronounced for advanced
stages, in agreement with previous reports concerning urothelial tumours.
Additionally, immunoblot studies revealed an over expression of 2,6 Neu5Ac
and tumor-associated carbohydrate-antigen sTn (Neu5Ac 2-6GalNAc 1-OSer/
Thr) in more advanced stages.
In overall, results thus suggest that the O-glycomic profile of urinary
glycoproteins reflects malignant transformations in the bladder, particularly in
advanced stages. Mestrado em Bioquímica - Métodos Biomoleculares
Tipo de Documento
Dissertação de Mestrado
Idioma
Português
Orientador(es)
Amado, Francisco Manuel Lemos; Ferreira, José Alexandre Ribeiro de Castro
