Autor(es):
Dória, Maria Luísa Mouta Faria Lima 
Data: 2011
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10773/7712
Origem: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Assunto(s): Métodos biomoleculares; Fosfolípidos; Células epiteliais; Cancro da mama; Carcinogénese
Descrição
Breast cancer is the leading cause of cancer-related death in women. Altered
cellular functions of cancer cells lead to uncontrolled cellular growth and
morphological changes. Cellular biomembranes are intimately involved in the
regulation of cell signaling; however, they remain largely understudied.
Phospholipids are the main constituents of biological membranes and play
important functional, structural and metabolic role. The aim of this work was to
establish if phospholipids profiles of mouse and human mammary epithelial
cells and breast cancer cells differ in relation to morphology and degree of
differentiation. For this purpose, phospholipids of cell lines were analyzed using
a lipidomic approach.
Briefly phospholipids were extracted from six different cell lines (three from
mouse and three from human) using Bligh and Dyer method, followed by a
separation of phospholipid classes by thin layer chromatography. Phospholipid
classes were quantified by phosphorus assay and analyzed by mass
spectrometry.
Important differences and similarities were found in the relative phospholipid
content between mouse and human cells, between non-tumorigenic and cancer
cells and between breast cancer cells with different levels of aggressiveness.
Mass spectrometry and quantification analysis showed substantial alterations in
the profile of sphingomyelin, cardiolipin and phosphatidylinositol classes
comparing non-tumorigenic with cancer cells. Alterations in the most
aggressive cell lines were observed in lysophosphatidylcholine,
phosphatidylethanolamine and phosphatidic acid classes.
Taken together, the results indicate that changes in phospholipid profile, either
from mouse and human cell lines, can be associated to the difference in cell
morphology, behavior and genetic expression, directly related to enzymatic and
metabolic activities known to be altered in cancer. Thus, identification of
phospholipid classes and their structure open new possibilities for exploration
of such characteristics in cancer and provide novel biomarkers and disclose
metabolic pathways with potential for therapy. O cancro da mama é a principal causa de morte por cancro nas mulheres.
Alterações nas funções celulares de células cancerígenas levam a um
crescimento celular descontrolado e mudanças morfológicas nestas.
Membranas celulares estão intimamente envolvidas na regulação da
sinalização celular; no entanto ainda muito está por compreender. Fosfolípidos
são os principais constituintes das membranas biológicas e possuem um papel
importante a nível funcional, estrutural e metabólico. O objectivo deste trabalho
foi compreender se os perfis fosfolípidos de células epiteliais e de cancro da
mama de ratinho e humanas diferem em relação a morfologia e grau de
agressividade das células. Para este objectivo os fosfolípidos de linhas
celulares foram analisados usando uma abordagem lipidómica.
Brevemente, os fosfolípidos foram extraídos de seis linhas celulares diferentes
(três de ratinho e três humanas) usando o método de Bligh and Dyer, seguida
de uma separação das classes de fosfolípidos por cromatografia em camada
fina. As diferentes classes de fosfolípidos foram quantificadas pela
quantificação de fósforo e analisadas por espectrometria de massa.
Diferenças e semelhanças importantes foram encontradas n entre células de
ratinho e humanas, entre células não tumorais e células cancerígenas e entre
células do cancro da mama com diferentes graus de malignidade. A
espectrometria de massa e a análise por quantificação mostraram alterações
no perfil das classes esfingomielina, cardiolipina e fosfatidilinositol. Alterações
nas células mais agressivas foram observadas nas classes lisofosfatidilcolina,
fosfatidiletanolamina e ácido fosfatídico.
Concluindo, os resultados indicam que as diferenças no perfil fosfolipídico
tanto em células de ratinho como células humanas, podem ser associadas a
morfologia, comportamento e expressão genética da célula, directamente
relacionado com actividades enzimáticas e metabólicas que são conhecidas de
estarem alteradas no cancro. Assim, a identificação das classes de fosfolípidos
e sua estrutura abrem novas possibilidades para a exploração destas
características no cancro e providenciam potenciais biomarcadores divulgando
vias metabólicas com potencial para a terapia. Mestrado em Bioquímica - Métodos Biomoleculares
Tipo de Documento
Dissertação de Mestrado
Idioma
Inglês
Orientador(es)
Domingues, Maria do Rosário Gonçalves Reis Marques; Shepherd, Luísa Alejandra Helguero
