Author(s):
Sousa, Inês Cátia Dinis de 
Date: 2007
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/744
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Biologia molecular; Fungos patogénicos; Doenças infecciosas
Description
As leveduras do género Candida constituem um grupo muito diverso de fungos
que inclui espécies comensais da microflora humana normal, podendo tornarse
patogénicas em determinadas condições de imunodepressão do
hospedeiro. Apesar de várias espécies do género Candida estarem associadas
a infecções em humanos, o principal agente é C. albicans, responsável por
diversas candidíases superficiais das mucosas mas também por infecções
sistémicas denominadas candidémias. Uma vez que a patogenicidade e
susceptibilidade a antifúngicos varia entre estirpes da mesma espécie, é crucial
uma identificação rápida e fiável da estirpe causadora da infecção para que
possa ser aplicado o tratamento mais adequado.
O principal objectivo do presente trabalho consiste na descrição e
caracterização de um novo microssatélite de C. albicans localizado no gene
IFF8 e que codifica uma proteína semelhante a Hyr1, um componente da
parede celular da forma de hifa de C. albicans. Para tal, utilizaram-se 78
isolados clínicos independentes provenientes de dois produtos biológicos,
hemocultura e exsudados vaginais, e oriundos de pacientes internados em
diversas instituições hospitalares. Foram identificados 16 alelos, com
comprimentos entre 200 e 316 pares de bases, e 27 genótipos, o que resulta
num poder de discriminação de cerca de 0.90. Foi ainda possível identificar
genótipos específicos de isolados de hemoculturas, assim como de exsudados
vaginais. Para determinar a origem da variabilidade alélica deste microssatélite
a análise da estrutura dos diferentes alelos foi efectuada por sequenciação
revelando a sua estrutura composta. Dada a localização deste microssatélite
no gene IFF8 de C. albicans e uma vez que as proteínas GPI podem estar
envolvidas na biossíntese e remodelação da parede celular, na adesão às
células do hospedeiro e na virulência, a sua variabilidade poderá estar
relacionada com o grau de virulência das estirpes em estudo.
ABSTRACT: Yeasts of the genus Candida include a variety of human commensal species
that may become pathogenic in immunocompromised hosts. The predominant
causal agent of candidiasis is C. albicans, responsible for superficial infections
and systemic life threatening conditions. Since pathogenicity and antifungal
susceptibility often vary between strains, it is crucial to rapidly and accurately
identify the strain causing infection so that tha adequate treatment could be
selected.
The aim of this work was to characterize a new microsatellite locus located
inside IFF8 gene of C. albicans and coding for a GPI anchored protein similar to
Hyr1 which is a cell wall component of the C. albicans hypha. Seventy eight
independent C. albicans isolates from two biological products, blood cultures
and vaginal exudates, and different health institutions were analysed. A total of
16 alleles, with lenghts varying between 200 and 316 bp were found and twenty
seven genotypes were identified resulting in a discriminating power of 0.90. It
was also possible to identify specific genotypes of blood culture isolates as well
as specific of vaginal exudates isolates. Allele length variability was studied by
sequence analysis showing that this is a compound microsatellite with a
complex internal structure. Given the location of this microsatellite in C. albicans
IFF8 gene and since GPI proteins may be involved in cell wall biosynthesis and
remodelling, adhesion and virulence, its variability may be related to strain
virulence. Mestrado em Biologia Molecular e Celular
Document Type
Master Thesis
Language
English
Advisor(s)
Pais, Célia do Sacramento Santos; Cunha, Ângela
