Author(s):
Batista, Carla Isabel Soares 
Date: 2007
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/731
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Toxicologia; Doença de Parkinson; Neurónios
Description
O stress oxidativo ao nível da via nigroestriatal é reconhecido como uma das
causas da degeneração dos neurónios dopaminérgicos da substantia nigra na
doença de Parkinson (DP), sendo o efeito protector do estradiol
recorrentemente associado à protecção contra o stress oxidativo. A acção
protectora do estradiol na via nigroestriatal pode ainda envolver outros efeitos,
tais como modulação da expressão de factores neurotróficos cuja capacidade
de promover a sobrevivência neuronal é sobejamente conhecida. Neste
trabalho analisámos a regulação dos níveis do factor neurotrófico derivado de
uma linha de células da glia (GDNF) pelo 17β-estradiol na substantia nigra e
determinámos qual a contribuição específica deste efeito para a acção
neuroprotectora da hormona. Adicionalmente, estudámos a modulação do
efeito do 17β-estradiol na expressão de GDNF por agentes oxidantes,
levodopa (L-DOPA) e H2O2. Para determinar os níveis de GDNF procedemos a
análise de Western-Blot em extractos de células pós-natais de substantia nigra
em cultura após incubação com 17ß-estradiol. Realizámos estudos in vivo para
determinar de que forma o 17ß-estradiol afecta a acção da toxina
dopaminérgica 6-hidroxidopamina (6-OHDA), quer ao nível da viabilidade das
células dopaminérgicas, como ao nível da expressão dos níveis de GDNF. Os
resultados obtidos permitiram concluir que, em células pós-natais de
substantia nigra em cultura, o 17ß-estradiol promoveu o incremento da
expressão do GDNF pelos astrócitos, provavelmente via ligação a receptores
membranares. Verificámos ainda que os efeitos do estradiol parecem ser
potenciados pela a exposição a L-DOPA e H2O2. In vivo, o estradiol protegeu
as células dopaminérgicas da substantia nigra da lesão causada por 6-OHDA,
possivelmente através da estimulação da síntese de GDNF observada nestas
condições.
ABSTRACT: Estradiol is currently considered a neuroprotector agent of nigral dopaminergic
neurons. Oxidative stress in the nigrostriatal pathway has been associated with
the development of Parkinson disease and the protective effect of estradiol is
thought to be associated with a defence against oxidative stress. The
protection promoted by estradiol in nigrostriatal pathway may also be coupled
to the expression of neurotrophic factors, molecules recognized by its capability
to promote neuron survival. In this study we analysed how 17ß-estradiol
regulates nigral glial cell line deriv GDNF levels and evaluated the contribution
of this effect to the neuroprotective action of this hormone. We also assessed
how levodopa (L-DOPA) and H2O2 modulated the effect of estradiol on GDNF
expression.
Western-Blot analysis was used to determine GDNF levels in cultured
substantia nigra cells after incubation with 17ß-estradiol. Using in vivo studies
we evaluated how 17ß-estradiol affects the action of the dopaminergic toxin - 6-
hidroxydopamine (6-OHDA) on the dopaminergic cell viability and the
expression of GDNF. Taken together the results showed that, in cultured
postnatal substantia nigra cells, 17ß-estradiol promoted the increase of GDNF
expression by astrocytes through activation of putative membrane receptors.
Exposure to the oxidative agents L-DOPA and H2O2 augmented the effect of
estradiol. In vivo, estradiol protected nigral dopaminergic cells from 6-OHDA
induced injury, possibly through stimulation of GDNF synthesis. Mestrado em Toxicologia
Document Type
Master Thesis
Language
Portuguese
Advisor(s)
Baltazar, Graça Maria Fernandes; Gonçalves, Maria Paula Polónia
