Author(s):
Ferreira, Catarina de Oliveira
Date: 2008
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/3021
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Química dos alimentos; Biopolímeros
Description
O objectivo deste projecto consistiu na preparação de filmes comestíveis à
base de proteínas do soro do leite (WPI) a pH 7 na presença de quitosano,
como potenciais revestimentos de queijos, pois este apresenta propriedades
biológicas interessantes, nomeadamente, actividade antimicrobiana. Com a
incorporação deste polissacarídeo na matriz proteica, pretendia-se verificar se
a sua presença provocaria uma melhoria das propriedades mecânicas e de
barreira dos filmes de WPI. No entanto, uma vez que o quitosano é um
polissacarídeo catiónico, chegou-se à conclusão que a mistura destes dois
polímeros em solução a pH superior ao ponto isoeléctrico do WPI (pI 5,2),
conduzia à precipitação dos mesmos. Deste modo, na impossibilidade de
formar filmes de WPI a pH7 na presença de quitosano de massa molecular
média, procedeu-se à preparação de filmes à base de quitosano e WPI a pH
3,5 nas seguintes proporções: 1:0, 6:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2 e 1:3
(quitosano:proteína), mantendo constante a quantidade total de polímero por
unidade de área. Neste caso, utilizou-se um filme de quitosano como controlo
porque a pH<6,5 as pontes dissulfureto não se estabelecem entre as cadeias
proteicas, pelo menos em número que possibilite, nestas condições de pH, a
obtenção de filmes com propriedades mecânicas satisfatórias. Estes filmes
apresentaram duas superfícies distintas: superfície superior (exposta às
condições atmosféricas de temperatura e humidade durante a secagem) e a
superfície inferior (em contacto com a placa de acrílico), pelo que ambas as
superfícies foram caracterizadas. Os filmes de quitosano e WPI apresentam
propriedades mecânicas moderadas (pouco flexíveis e baixa resistência
mecânica), são barreiras moderadas ao vapor de água e verificou-se ainda
que se trata de um sistema pouco estável, no qual ocorre a separação de
fases (através da análise por espectroscopia de infravermelho e microscopia
electrónica de varrimento (SEM)).
Uma vez que os filmes preparados a pH ácido apresentavam uma estrutura
heterogénea e com propriedades mecânicas pouco interessantes, decidiu-se
incorporar uma amostra comercial de oligoquitosanos (massa molecular média
1700 Da) na matriz de WPI, pois os oligoquitosanos são solúveis em água e
biologicamente mais eficazes. Assim, foram preparados filmes de WPI e
oligoquitosanos a pH 7 nas seguintes proporções: 100:1, 75:1 e 50:1, tendo
como controlo um filme constituído apenas por WPI. A presença dos
oligoquitosanos promoveu a diminuição da rigidez e o aumento da flexibilidade
da matriz, o aumento da hidrofilicidade da superfície dos filmes, sem provocar
alterações significativas da morfologia da superfície e da permeabilidade ao
vapor de água dos mesmos.
Conclui-se assim que a incorporação de oligoquitosanos poderá ser uma
estratégia vantajosa para se conseguirem filmes de WPI, com propriedades
mecânicas satisfatórias e actividade antimicrobiana útil em aplicações
alimentares.
ABSTRACT: The aim of this work was to prepare edible biopolymer films of whey protein
isolate at pH 7 and chitosan, as a potential cheese cover, taking advantage
from the useful chitosan’s biological properties, in particular, antimicrobial
activity. The polysaccharide incorporation was made to check if their presence
would improve mechanical and barrier properties of films. However, since
chitosan is a cationic polysaccharide, the mixture in solution of these two
polymers at pH above the isoelectric point of protein (pI 5.2) led to precipitation
of them. Due to the impossibility of forming WPI films at pH 7 in the presence of
chitosan with intermediate molecular weight, new films were prepared with
chitosan and WPI at pH 3.5 in the following proportions: 1:0, 6:1, 3:1, 2:1, 1:1,
1:2 and 1:3. (chitosan:protein), keeping constant the total amount of polymer
per unit of area. In this case, a chitosan film was used as control because
disulfide bridges are not established between protein chains at pH below 6.5, or
at least would not be formed in enough amount to originate a film with
acceptable mechanical properties. The prepared films had two different
surfaces: upward surface (was exposed to atmospheric conditions of humidity
and temperature during the drying process) and downward surface (in contact
with acrylic plate during the drying process), which were characterized
independently. After the films characterization it was concluded that these have
moderate mechanical properties, and moderate water vapour permeability. It
was also noticed that these films are heterogeneous systems in which phase
separation occurs (through FTIR and SEM analysis).
Since the prepared films at acid pH had a heterogeneous structure and
unattractive mechanical properties, it was decided to incorporate a commercial
sample of chitooligosaccharides (average molecular weight 1700 Da) in the
WPI matrix, taking advantage of their higher water solubility (unlike chitosan
with higher molecular weight) and more effective biological activity. Thus WPI
and chitooligosaccharides were prepared at pH 7 in the following proportions:
100:1, 75:1 and 50:1, using a WPI film as control. The presence of
chitooligosaccharides promoted the reduction of stiffness and the increasing of
elongation of the matrix, the increase in film’s surface hydrophilicity, but did not
change, significantly, the film’s surface morphology and their water vapour
permeability. Therefore, incorporation of the chitooligosaccharides may be an
attractive strategy in order to obtain films and coatings with potential
antimicrobial activity, and satisfactory mechanical properties and barrier
properties. Mestrado em Bioquímica e Química dos Alimentos