Autor(es):
Félix, Carina Rafaela Faria da Costa 
Data: 2012
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10773/10469
Origem: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Assunto(s): Biologia; Fungos patogénicos; Doenças das plantas; Citotoxicidade; Doenças infecciosas
Descrição
Lasiodiplodia theobromae é um fungo fitopatogénico responsável por inúmeras
doenças em variadas plantas. Embora este fungo seja tipicamente de regiões
tropicais e subtropicais, também ocorre em climas mais frios. L. theobromae
tem também sido descrito como oportunista em humanos, causando infeções
com diferentes níveis de gravidade. Apresenta, assim, uma grande
adaptabilidade a diferentes ambientes, sendo capaz de utilizar os seus
mecanismos de virulência numa ampla gama de temperaturas.
O objetivo desta investigação é caracterizar o crescimento de dois isolados -
um isolado ambiental, CAA019 e um isolado clínico, CBS339.90 - a diferentes
temperaturas (temperatura ambiente e temperatura do corpo humano).
Tendo em conta a relevância deste organismo como fitopatogénico assim
como a sua crescente importância como oportunista de humanos, este estudo
poderá ter uma grande relevância para agricultura, bem como para a saúde
humana.
As condições ótimas de cultivo destes isolados foram determinadas: o meio
de cultura Potato Dextrose Agar como melhor meio para o cultivo e a
temperatura de 30ºC como sendo a temperatura ótima de crescimento para
ambos os isolados. Verificou-se ainda que a presença de luz continua tem um
efeito positivo no crescimento de L. theobromae e que o seu crescimento
máximo é atingido entre as 96 horas e as 120 horas de incubação.
Verificou-se ainda que ambos os isolados expressam proteínas extracelulares
de um modo dependente da temperatura, assim como do isolado.
Por último, foi possível verificar que ambos os isolados produzem moléculas
extracelulares com propriedades citotóxicas numa linhagem de células Vero
(células de rins de macaco verde africano) verificando-se que ambos os
isolados são citotóxicos nestas células. As maiores perdas de viabilidade são
atingidas às temperaturas de 25ºC e 30ºC para o isolado ambiental e a 30ºC
e 37ºC para o isolado clínico. Lasiodiplodia theobromae is a phytopathogenic fungus responsible for a countless
number of diseases in various plants. Although this fungus is typically from
tropical and subtropical regions, it can also occur in colder climates. It has
been also described as an opportunist in humans, causing infections of
different levels of severity. L. theobromae thus presents a great capacity of
adaptation to different environments, being able to use its virulence
mechanisms in a wide range of temperatures.
The aim of this investigation is to characterize two different isolates – an
environmental isolate, CAA019, and a clinical isolate, CBS339.90 – at different
temperatures (environmental temperature and human body temperature).
Due to the relevance of this species as a phytopathogenic agent, as well as its
growing importance as an opportunist pathogen in humans, this study may
reveal itself as being extremely relevant both to agriculture and to human
health.
The optimal growth conditions of these isolates have been determined: Potato
Dextrose Agar is the best culture medium and the temperature of 30ºC the
optimal growth temperature for both isolates. It has also been shown that
continuous light has a positive effect in the growth of L. theobromae and that
this fungus reaches its maximum growth between 96 hours and 120 hours of
incubation.
Also, a differential extracellular protein expression has been detected,
depending both on the temperature of growth and on the isolate.
Lastly, it was possible to verify that both isolates produce extracellular
molecules with cytotoxic properties against a Vero cell line (cells from the
kidneys of African Green Monkey), thus concluding that both isolates are
cytotoxic for this cells. Lowest values of cell viability have been achieved for
the temperatures of 25ºC and 30ºC in the case of the environmental isolate,
and for the temperatures of 30ºC and 37ºC in the case of the clinical isolate
suggesting that there may be some specificity of the isolate towards its host. Mestrado em Biologia Aplicada
Tipo de Documento
Dissertação de Mestrado
Idioma
Português
Orientador(es)
Esteves, Ana Cristina; Alves, Artur
