Author(s):
Raposo, Mariana Isabel Cordeiro 
Date: 2012
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/10454
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Bioquímica clínica; Esclerose sistémica; Reumatismo; Autoimunidade
Description
A Esclerose Sistémica é uma doença reumática autoimune do
tecido conjuntivo, caracterizada por anormalidades do sistema vascular
e imune, que levam à fibrose da pele e órgãos internos. A
fisiopatologia desta doença é ainda desconhecida. Contudo existe a
hipótese de que os linfócitos Th17/Tc17 e que as células que se
caracterizam pela expressão de CXCR5 estejam de algum modo
envolvidas nesta doença, pelo facto de elas terem um papel importante
em outras doenças autoimunes. Deste modo, o presente trabalho teve
com objetivo quantificar e caracterizar funcionalmente as células
Th(c)17, Th(c)1 e os subtipos Th17 CXCR5+ e Th1 CXCR5+ no
sangue periférico de doentes com Esclerose Sistémica.
Para tal, o sangue periférico de 43 doentes com Esclerose
Sistémica e de 20 pessoas saudáveis foi colhido e os linfócitos T foram
inicialmente estimulados in vitro para se quantificar a produção das
suas citocinas. Seguiu-se um protocolo de permeabilização
intracitoplasmática de forma a se analisar separadamente a expressão
intracelular das citocinas IL-17, IL-2, TNF-α e IFN-γ nas diferentes
subpopulações de linfócitos em estudo. Os doentes com Esclerose
Sistémica foram divididos consoante o subtipo da doença e consoante
o tempo de duração da doença desde o diagnóstico.
Os resultados obtidos demonstraram que não existiam diferenças
na frequência de células Th17 e Tc17 entre os grupos estudados. No
entanto, a frequência destas células a produzir IL-2 e TNFα é maior
nos doentes com Esclerose Sistémica. Para além disso verificou-se que
com aumento da duração da doença em estudo, há um aumento da
frequência das células Th1 e Tc1 a produzir TNFα e IFNγ. Verificouse
ainda que a frequência dos subtipos Th1 CXCR5+ a produzir as
citocinas IL-2 e TNFα parece distinguir os dois subtipos de Esclerose
Sistémica.
Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que as células
Th17 e as células Th1 estão, do ponto de vista funcional, alteradas em
SSc, o que aponta para o seu envolvimento na fisiopatologia e/ou
progressão da doença. Systemic Sclerosis is an autoimmune rheumatic disease of the
connective tissue, characterized by vascular and immune system
abnormalities, leading to fibrosis of the skin and internal organs. The
pathophysiology of this disease is still unknown. However there is a
hypothesis that Th17 and Tc17 lymphocytes and cells that are
characterized by expression of CXCR5 are somehow involved in this
disease since they have an important role in other autoimmune
diseases. Thus, the present study aimed to quantify and functionally
characterize Th(c)17 and Th(c)1 cells and Th17 CXCR5+ and Th1
CXCR5+ subtypes in peripheral blood of patients with Systemic
Sclerosis.
To this end, peripheral blood from 43 patients with Systemic
Sclerosis and 20 healthy individuals was collected and T lymphocytes
were stimulated in vitro to quantify their cytokine production. This
was followed by an intracytoplasmic permeabilization protocol in
order to separately analyze the intracellular expression of IL-17, IL-2,
TNF-α and IFN-γ in the different T cell subpopulations in analysis.
Patients with Systemic Sclerosis were divided depending on the
disease subtype and the disease duration since diagnosis.
The results showed that there were no differences in the
frequency of Th17 and Tc17 cells between groups. However, the
frequency of these cells producing IL-2 and TNFα is greater in patients
with systemic sclerosis. Furthermore it was found an increase
frequency of TNFα- and IFNγ-producing Th1 and Tc1 cells, with the
increasing duration of disease. It was further found that the frequency
of CXCR5 + Th1 subtypes producing IL-2 and TNFα cytokines can
distinguish the two subtypes of systemic sclerosis.
The present results suggest that Th17 cells and Th1 cells are at the
functional point of view altered in SSc, which points to their
involvement in the pathophysiology and/or disease progression. Mestrado em Bioquímica - Bioquímica Clínica
Document Type
Master Thesis
Language
Portuguese
Advisor(s)
Paiva, Artur Augusto; Domingues, Maria do Rosário Gonçalves Reis Marques
