Autor(es):
Lopes, Fernando Manuel Carvalho 
Data: 2014
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10348/2870
Origem: Repositório da UTAD
Assunto(s): Enzimas antioxidantes; Dano no DNA; Espermograma; Citogenética; Stresse oxidativo; Peroxidação lipídica; 575.11(043); 577.15(043); 616.697(043)
Descrição
Infertilidade é a falha na concepção após 2 anos de relações sexuais sem a utilização de
qualquer método contraceptivo. Estima-se que aproximadamente 15% dos casais, em idade fértil,
à procura da primeira gravidez, enfrentem esta situação.
Aproximadamente 1 em cada 15 homens têm problemas de fertilidade, a infertilidade
masculina pode ter inúmeras causas como alterações anatómicas, hormonais, genéticas,
imunológicas, infecções ou estilo de vida e exposição a factores ambientais.
Dependendo da concentração, localização e tempo de exposição, as espécies reactivas a
oxigénio (ROS) podem ter efeitos benéficos ou prejudiciais sobre os espermatozóides. Níveis
baixos de ROS são essenciais para a fertilização, reacção acrossómica, hiperativação, motilidade e
capacitação. Níveis elevados podem levar a apoptose, peroxidação lipídica, dano no DNA e dano
nas proteínas.
Neste trabalho foram analisadas 66 amostras de sémen por espermograma e para cada
indivíduo realizada análise citogenética convencional. Destas foram escolhidas 25 amostras para
detecção de aneuploidias espermáticas dos cromossomas sexuais. Foram avaliadas 48 amostras
quanto à actividade da catalase (CAT) e glutationa S-transferase (GST) e 51 amostras foram
avaliadas quanto à actividade da superóxido dismutase (SOD). Determinaram-se as concentrações
de malonildialdeído (MDA) (n= 31), hidroperóxidos (n= 35) e tióis totais (n= 36) em amostras
previamente seleccionadas. O dano no DNA foi determinado pela técnica de TUNEL em 53
amostras e pelo ensaio de Cometa com e sem incubação com a enzima FPG em 49 amostras.
Encontraram-se associações entre os parâmetros da qualidade espermática, e os
resultados da concentração de MDA, hidroperóxidos e tióis totais, a actividade das enzimas
antioxidantes (SOD, CAT e GST) e o dano no DNA proveniente dos ensaios de TUNEL e Cometa.
Em conclusão, o estudo do stresse oxidativo nos espermatozóides é extremamente
importante para se perceber a etiologia da infertilidade masculina idiopática. Infertility is a failure to conceive after at least one year of unprotected intercourse. It has
been estimated that approximately 15% of the population in industrially developed countries are
affected.
Approximately 1 in 15 men have fertility problems. Male infertility can have many causes
such as anatomic changes, hormonal changes, immune alterations, infections, genetic or lifestyle
and exposure to environmental factors.
Depending on the concentration, location and time of exposure, reactive oxygen species
(ROS) can have beneficial or harmful effects on sperm. Low levels of ROS are essential for
fertilization, acrosome reaction, hyperactivation, motility and capacitation. Elevated levels can
lead to apoptosis, lipid peroxidation, DNA damage and damage to the proteins.
We studied 66 samples of semen for semen analysis and for each case performed
conventional cytogenetic analysis. 25 were chosen for the detection of sex chromosomes
aneuploidy in sperm. 48 samples were selected for evaluation of glutathione S-transferase (GST)
and catalase (CAT) activity of 51 samples for the evaluation of superoxide dismutases (SOD)
activity. We determined the amount of malondialdehyde (MDA) (n= 31), hydroperoxides (n= 35)
and total thiols (n= 36). The DNA damage was determined by TUNEL technique in 53 samples and
comet assay with and without FPG hybridization in 49 samples.
We have found associations between the parameters of sperm quality, and the results of
MDA, hydroperoxides and total thiols concentration, the activity of antioxidant enzymes (SOD,
CAT and GST) and DNA damage coming from Comet and TUNEL assays.
In conclusion, the study of oxidative stress in spermatozoa is extremely important to
understand the etiology of idiopathic male infertility. Dissertação de Mestrado, 2º Ciclo em Biotecnologia para as Ciências da Saúde
