Autor(es):
Gonçalves, Alexandra Filipa Pereira 
Data: 2011
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10451/8028
Origem: Repositório da Universidade de Lisboa
Assunto(s): Estimulantes do tipo anfetamina; Sangue total; Urina; SPE; BAµE; GC-MS; LC-MC; Validação; Teses de mestado - 2011
Descrição
Tese de mestrado em Química, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2011 Têm surgido no mercado ilícito novas drogas de abuso sintéticas, em particular os denominados estimulantes do tipo anfetamina (ATS), dentro dos quais se incluem os compostos 2-[4-(etiltio)-2,5-dimetoxifenil]etanamina (2C-T-2), 2-[2,5-dimetoxi-4- (propiltio)fenil]etanamina (2C-T-7), p-metoxianfetamina (PMA), p-metoximetanfetamina (PMMA), efedrina, norefedrina e metcatinona. O consumo excessivo deste tipo de drogas deve-se, em grande parte, à falsa ideia de inocuidade e ainda aos efeitos psicoactivos estimulantes que apresentam, embora alguns ATS tenham sido associados a mortes na Europa. A identificação e quantificação destas drogas em fluidos biológicos é imperativa, particularmente em contexto forense, sendo esse o principal objectivo da presente dissertação. Foi então desenvolvido e validado um método de identificação e quantificação simultânea de ATS em amostras de sangue total, com análise por GC-MS em modo SIM após extracção por SPE e derivatização. O método analítico revelou-se linear de 5 (limite de quantificação) a 500 ng/mL, com coeficientes de determinação (R2) superiores a 0,99 para todos os analitos, excepto para a metcatinona (0,96). Os limites de detecção (LOD) foram 1 ng/mL para todos os analitos e o método foi considerado selectivo e robusto. A precisão variou de 7 a 14%, enquanto a exactidão se situou dentro de um intervalo de ± 15% para todos os analitos, com excepção da efedrina na concentração mais elevada (17%) e metcatinona, cumprindo em geral os critérios aceites para a validação de métodos bioanalíticos. A eficiência da extracção foi superior a 80% para todos os analitos em estudo. O método desenvolvido e validado foi considerado adequado para confirmação dos ATS e quantificação de 2C-T-2, 2C-T-7, PMA, PMMA, efedrina e norefedrina em amostras de sangue. Posteriormente, procedeu-se à aplicação de uma metodologia alternativa para a análise dos ATS, a microextracção adsorptiva em barra (BAUE). Assim, os analitos alvo foram extraídos de amostras de urina por BAUE(AC) e analisados por LC-MS/MS. Considerando que a metodologia foi aplicada em condições padrão, os resultados preliminares obtidos foram considerados satisfatórios, com a eficiência de extracção a situar-se entre os 19% e os 48% e LOD de 2 ng/mL. New synthetic drugs of abuse have recently appeared in the illicit market, particularly the so-called amphetamine-type stimulants (ATS), such as 2-[4-(ethylthio)-2,5- dimethoxyphenyl]ethanamine (2C-T-2), 2-[2,5-dimethoxy-4-(propylthio)phenyl]ethanamine (2C-T-7), p-methoxyamphetamine (PMA), p-methoxymethamphetamine (PMMA), ephedrine, norephedrine and methcathinone. A remarkable increase has been observed in the abuse of those drugs due in large part to the erroneous idea of safety and their psychoactive effects, although some ATS have been associated to deaths in Europe. In this sense, it’s justified the need of development of an analytical methodology for the identification and quantification of these drugs in biological fluids, which was the main goal of this work. Thus, a method for the simultaneous identification and quantification of ATS in whole blood samples was developed and fully validated. These were analyzed by GC-MS in SIM mode after SPE and derivatization. The method was linear from 5 (limit of quantification) to 500 ng/mL, with determination coefficients (R2) higher than 0.99 for all analytes, except for methcathinone (0.96). The limits of detection (LOD) were 1 ng/mL for all analytes and the method was considered selective and robust. The precision ranged from 7 to 14%, while accuracy was within a ± 15% interval for all analytes, except for ephedrine at the highest concentration level (17%) and methcathinone, fulfilling the criteria usually accepted for bioanalytical method validation. Extraction efficiency was higher than 80% for all analytes. Therefore, the method developed and validated was considered adequate for screening and confirmation of all ATS and quantification of 2C-T-2, 2C-T-7, PMA, PMMA, ephedrine and norephedrine in blood samples. An alternative procedure was tested, the bar adsorptive micro-extraction (BAμE). Thus, the target analytes were extracted from urine samples by BAμE(AC) and analyzed by LC-MS/MS. Considering that the methodology was applied in standard conditions, the preliminary results were satisfactory, presenting extraction efficiencies between 19% and 48% and LOD of 2 ng/mL.
