Autor(es):
Parreira, Diana 
Data: 2013
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10400.18/2335
Origem: Repositório Científico do Instituto Nacional de Saúde
Assunto(s): Composição de Alimentos; HPLC; Vitamina D; Géneros Alimentícios; Validação; Incerteza; Vitamin D; Foodstuffs; Validation; Uncertainty
Descrição
Dissertação de Mestrado em Engenharia Química e Biológica, apresentada ao Instituto Superior de Engenharia de Lisboa, 2013 [PT] Resumo
O objetivo deste trabalho foi o de realizar os ensaios de validação necessários à
acreditação de um método analítico para determinação da vitamina D em matrizes
alimentares. Após validação, o método foi aplicado a matrizes que incluíram papas
infantis, iogurtes, cereais, leite, ovos e massas infantis.
De forma a atingir este fim, foram otimizados procedimentos de tratamento das
amostras e validado um método analítico baseado na norma europeia, EN 12821, o
qual permitiu a determinação do teor em vitamina D através de cromatografia líquida
de alta eficiência (HPLC) pelo método do padrão interno.
De forma a quantificar a vitamina D na matriz alimentar, as amostras sofreram um
processo de saponificação seguido de extração líquido-líquido, e por fim isolamento e
concentração através de cromatografia de HPLC semi-preparativa em fase normal e,
quantificação através de HPLC analítica em fase reversa a um comprimento de onda
de 265 nm.
De forma a validar o método de HPLC foram determinados os parâmetros de
validação: precisão (repetibilidade e precisão intermédia), limite de deteção e de
quantificação, recuperação e exatidão.
Utilizando os resultados da validação, precisão intermédia e exatidão, foi determinada
a incerteza do resultado da medição. A avaliação da incerteza total conduziu ao valor
de 26%, para o nível de confiança de 95%.
O teor em vitamina D nas amostras analisadas variou entre 0,28 μg/100 g e
22 μg/100 g. Os resultados da análise das amostras mostraram que 14% destas
apresentavam valores superiores aos indicados nos respetivos rótulos e 43% valores
inferiores aos rotulados. Tendo em considerações as porções definidas na rotulagem
das amostras analisadas duas amostras ultrapassaram a dose diária recomendada
(5 µg) se for consumida apenas uma porção (30 g).
Os resultados obtidos permitiram concluir que o método validado é adequado para a
determinação da vitamina D nas diversas matrizes analisadas. [ENG] The objective of this study was to perform the required validation tests for accreditation
of an analytical method for determination of vitamin D in food matrices. After validation,
the method was applied to matrices that included infant porridge, yogurts, cereals, milk,
eggs and infant pasta.
In order to achieve this end, the procedures for processing samples were optimized
and was validated an analytical method based on the European standard, EN 12821,
which allowed the determination of vitamin D content using high performance liquid
chromatography (HPLC) by the method of internal standard.
In order to quantify the vitamin D in the food matrix, the samples were subjected to a
process of saponification followed by liquid-liquid extraction and finally concentration
and isolation by a normal phase HPLC semi-preparative and quantified by reverse
phase HPLC analytical on a wavelength of 265 nm.
In order to validate the HPLC method were determined the validation parameters:
precision (repeatability and inter-run precision), limit of detection and quantification,
recovery and accuracy.
Using the results of the validation, inter-run precision and accuracy, the uncertainty of
the measurement result was determined. The assessment of total uncertainty led to a
value of 26% for the confidence level of 95%.
The vitamin D content in the samples ranged from 0.28 µg/100 g and 22 µg/100 g. The
results of the samples analysis showed that 14% of these were higher than the values
indicated by the label and 43% lower than labeled values. Taking into consideration the
portions size defined in the samples lable, two samples exceeded the recommended
daily dose (5 µg) if consumed only a portion (30 g).
The results showed that the validated method is suitable for the determination of
vitamin D in different matrices analyzed.
Tipo de Documento
Dissertação de Mestrado
Idioma
Português
Orientador(es)
Dias, M.Graça; Serra, M.Celeste
