Author(s):
Domingues, Ana Beatriz Cainço 
Date: 2013
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10316/24690
Origin: Estudo Geral - Universidade de Coimbra
Subject(s): Carcinoma pavimento-celular da cavidade oral (CPCCO); Mecanismos moleculares; Metilação de DNA; MS-MLPA
Description
Resumo
O carcinoma pavimento-celular da cavidade oral (CPCCO) representa um grupo de
neoplasias, de origem epitelial, localizadas em diversos locais anatómicos da cavidade
oral. As taxas de incidência e mortalidade associadas a esta neoplasia são elevadas,
especialmente nos países desenvolvidos. O CPCCO representa a nível mundial a décima
neoplasia mais comum nos homens, sendo mais frequente em indivíduos do género
masculino do que feminino (2:1). Nas últimas décadas foram realizados progressos
consideráveis na terapêutica para esta neoplasia, contudo estes não foram
acompanhados pelo aumento da sobrevida a 5 anos. Uma das principais razões para este
facto reside na realização do diagnóstico tardio. Deste modo é necessário a investigação
genética para a deteção da doença em estadios iniciais de desenvolvimento, através do
estudo de potenciais biomarcadores associados ao cancro oral. O objetivo principal
deste trabalho consiste no estudo das alterações genéticas e epigenéticas de 30 amostras
de CPCCO através da técnica de MS-MLPA. Simultaneamente foi pretendido validar o
material parafinizado para estudos retrospetivos. A análise por MS-MLPA demonstrou
alteração no número de cópias e no perfil de metilação de 37 genes supressores
tumorais, sendo as alterações mais frequentes encontradas nos genes WT1, GSTP1,
BRCA1, GATA5, CDKN2A, PYCARD, PAX5, MLH3, MSH6, CASR e TP53. Os
resultados obtidos na comparação entre as amostras de tecido fresco e parafinizado
foram de forma geral satisfatórios. Em conclusão, este trabalho permitiu verificar
algumas alterações moleculares concordantes com as alterações referidas na literatura
como associadas ao CPCCO, assim como associar alterações em determinadas regiões
cromossómicas ou genes com o desenvolvimento tumoral. Desta forma, este estudo
contribui para a abordagem de potenciais biomarcadores com potencial valor para o
diagnóstico e prognóstico. Contudo novos estudos devem ser realizados com um n
amostral superior, de forma a estabelecer uma correlação entre as características clinicopatológicas
e o genótipo, determinar com maior precisão os genes associados ao
desenvolvimento e progressão do cancro oral, assim como aumentar a concordância
entre as amostras de tecido fresco e parafinizado. Oral squamous cell carcinoma (OSCC) represents a group of epithelial origin cancer
located at different anatomical sites of oral cavity. Oral cancer incidence and mortality
rates are high worldwide, especially in developed countries. OSCC represents globally
the tenth most common cancer in men and is more frequent in men than in women (2:1).
In the last decades considerable progress has been made in the treatment for this
disease, however this was not accompanied by increased survival beyond 5 years. One
of the main reason for this discrepancy seems to be the late diagnosis. Therefore it is
necessary the detection of the disease in early stages of development through the study
of potential genetic biomarkers associated with oral cancer. The main goal of this work
was the study of genetic and epigenetic alterations of 30 OSCC samples by MS-MLPA.
The analysis of MS-MLPA showed changes in copy number and methylation profile of
37 tumor suppressor genes. Additionally was also intended to validate the formalinfixed
paraffin-embedded (FFPE) tissue for retrospective studies. The most frequent
alterations were found in WT1, GSTP1, BRCA1, GATA5, CDKN2A PYCARD, PAX5,
MLH3, MSH6, CASR and TP53 genes. In conclusion, this work showed some molecular
aberrations consistent with those already described in the literature as associated with
OSCC, as well as the involvement of certain chromosomal regions or genes associated
with tumor development. Thus, this study highlighted some putative new biomarkers
with possible diagnostic and prognostic value. Futher studies enrolling a larger cohort
are needed in order to validate these putative biomarkers as well as increase the
agreement between fresh and FFPE samples. Dissertação de mestrado em Bioquímica, apresentada ao Departamento de Ciências da Terra da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.
